ＰＧＤ过程中的胚胎活检是一种创伤性显微操作，有可能影响活检后胚胎发育能力。在进行胚胎活检之前需要在透明带上打孔或者部分透明带切除。
一、透明带打孔方法
透明带打孔主要有３种方法：化学法、机械法和激光法。化学法主要是利用酸性液体消化透明带形成孔洞，由于酸性液体可能会影响胚胎发育，目前很少应用；机械法利用活检针机械摩擦透明带，形成孔洞，虽不存在化学物质对胚胎的不利影响，但显微操作技术难度相对高，操作时间过长会影响胚胎的细胞骨架，应用也不广泛；激光法利用激光消除透明带，操作简单，可任意调节孔洞大小，不直接接触胚胎，对胚胎发育影响小，是透明带打孔最为常用的方法。Ｍａｇｌｉ等报道极体活检时，机械或者激光法打孔对活检成功率的影响无统计学差异（Ⅲ级）。ＥＳＨＲＥＰＧＤ协会２０１０年ＰＧＤ／ＰＧＳ病例统计显示，激光法、化学法和机械法的应用例数分别为４２５０例、９５８例、４４３例。透明带打孔的时机选择，极体、分裂期胚胎活检一般在活检当时进行；囊胚期活检可在第３天或第５天进行透明带打孔（Ⅱ级、Ⅲ级）。第３天打孔时可以选择卵裂球与透明带的间隙处，避免对胚胎细胞的伤害；第５天时囊胚已经扩张，能够确定胚胎内细胞团所在位置，可以选择在内细胞团对侧进行开口，方便活检。
二、胚胎活检方法
对于分裂期胚胎，活检在无钙／镁离子的溶液中进行，以降低活检细胞裂解的比率。活检方法主要有抽吸法、机械切割法和激光切割法。抽吸法直接吸取极体和分裂期卵裂球，对囊胚而言可以在疝形成后使用激光法或机械切割法获取滋养层细胞。目前常用的做法是在第３天或第５天时将透明带开口，待滋养层细胞从开口处孵出，形成疝，对孵出细胞进行取样检测。
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